تاثیر هورمونهای r‏fsh و تستوسترون بر بلوغ اسپرماتید گرد موشی در سیستم هم کشتی سلول های vero

اسپرم سازی یک فرآیند سنجیده و دقیق است که در سن بلوغ آغاز شده و در سراسر زندگی تولید مثلی ادامه می یابد. سلول های ژرمینال در محیط کشت تحت شرایط خاصی قادر به تمایز حین میوز و بعد از آن هستند. سیستم های هم کشتی در حفظ سلول های سازنده اسپرم و روند اسپرم سازی نقش مهمی داشته و امکان حمایت از روند اسپرم سازی را فراهم می نماید. از این رو از این سیستم ها جهت بلوغ سلولهای ژرمینال و غلبه بر توقف تمایز سلول های سازنده اسپرم استفاده می شود. هورمون های fsh و تستوسترون نیز در شروع و بقاء اسپرم سازی مهم بوده و کاهش آنها سبب نقص در اسپرم سازی در محیط in vivo می گردد. از آنجا که همراهی سیستم هم کشتی با هورمون ها در مطالعات انجام شده وجود نداشت در این پژوهش، اثرات دو سیستم هم کشتی با سلولvero و سیستم هم کشتی با سلولvero حاوی هورمونهای r‏fsh و تستوسترون بر بلوغ سلول های اسپرماتید گرد مورد بررسی قرار گرفت. به این منظور سوسپانسیون سلولی از بیضه موش نژاد nmri با سن 12-8 هفته تهیه و به سه قسمت تقسیم گردید. یک قسمت در محیط dmem حاوی سرم (گروه شاهد)، قسمت دیگر بر روی تک لایه سلول vero (آزمون 1) و بخشی نیز در محیط حاوی تک لایه سلول های vero به اضافه هورمون های rfsh و تستوسترون(آزمون2) به مدت 96 ساعت کشت داده شد. تعداد سلول های اسپرماتیدگرد، اسپرماتیدهای در حال طویل شدن و اسپرماتیدهای طویل شده قبل از کشت و همچنین روزانه به مدت 96 ساعت با استفاده از میکروسکوپ نوری بررسی و ثبت گردید. میزان درصد زنده ماندن انواع سلول های اسپرماتید نیز در طی ساعات ذکر شده، با استفاده از آزمون تریپان بلو ارزیابی شده و نتایج حاصل توسط آزمون آماری repeated measure anova مقایسه شد. نتایج حاصل حاکی از آن بود که در سیستم هم کشتی vero در 24 ساعت اول کشت تعداد سلول های اسپرماتید در حال طویل شدن نسبت به گروه شاهد افزایش معنی دار نشان داد (001 0/0p< ). در سیستم هم کشتی حاوی هورمون های rfsh و تستوسترون نیز پس از 24 و48 ساعت کشت، به ترتیب تعداد سلول های اسپرماتید در حال طویل شدن و طویل شده نسبت به گروه شاهد افزایش معنی دار داشت( 0001/0p<)؛ ولی پس از سپری شدن زمان های فوق، به مرور تعداد انواع سلول های اسپرماتید کاهش یافت. از نظر تعداد سلول های اسپرماتید در حال طویل شدن در محیط کشت تفاوت معنی دار بین گروه های آزمون مشاهده نشد. درتمامی گروه ها میزان درصد زنده ماندن سلول های اسپرماتید در طول مدت زمان کشت، کاهش داشت و در گروه های آزمون به دلیل اثرات مثبت سیستم های هم کشتی وهورمون ها حیات سلول ها با درصد بالاتری حفظ شد. در مجموع نتایج این تحقیق نشان داد که بلوغ سلول های اسپرماتید گرد در هر دو سیستم هم کشتی و هم کشتی- هورمون حاصل می شود و سلول ها برای مدت زمان کوتاهی (حداکثر 48 ساعت) قادر هستند که مراحل تمایزی را پشت سر گذارند. لازم به ذکر است که از جهت زنده ماندن در محیط کشت و همچنین بلوغ، سیستم هم کشتی که به آن هورمون افزوده شده باشد بهتر عمل می کند.